蛋白质化学的测试方法-蛋白质的测验

2024-03-05 15:47:02 来源:延英网 作者:admin

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  1. 怎样测定蛋白质的含量最合理
  2. 蛋白质测定凯氏定氮法
  3. 食品中蛋白质含量怎么测?

1、怎样测定蛋白质的含量最合理

凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此,通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质),即: 蛋白质含量=含氮量/16%。

间接测定法:蛋白质与某些酸性或碱性色素分子结合形成不溶性的盐沉淀。用分光光度计测定未结合的色素,以每克样品结合色素的量来表示蛋白质含量的多少。

紫外吸收法可测定0.1-0.5mg/ml的蛋白质溶液,此操作简便,测定迅速,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,此法在蛋白质的制备中广泛应用。

蛋白质含量测定方法:紫外分光光度法蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范围内,蛋白质溶液的吸光值与其浓度成正比,可作定量测定。

蛋白质浓度测定方法如下:紫外分光光度法 紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。

2、蛋白质测定凯氏定氮法

蛋白质测定凯氏定氮法如下:凯氏定氮法原理:即在有催化剂的条件下,用浓硫酸硝化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨。

①凯氏定氮法 原理:蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热,蛋白氮转化为铵盐,在强碱性条件下将氨蒸出,用加有指示剂的硼酸吸收,最后用标准酸滴定硼酸,通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。

凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理是将蛋白质中的氮元素转化为氨,然后用硫酸进行吸收,再用标准酸滴定计算出蛋白质的含量。

凯氏定氮法简介:是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的,现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等,是分析有机化合物含氮量的常用方法。

在凯氏定氮法测定蛋白质含量实验中,消化阶段所用的试剂有浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜。其中加浓硫酸主要是消化,即是通过加热使硫酸将食物中的有机氮转化成无机氮。

3、食品中蛋白质含量怎么测?

取6支试管分别标号,前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,最后一支试管加待测蛋白质溶液,不加标准蛋白溶液,在室温下放置30分钟,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。

因此是通过测定食品中氮含量后再根据换算系数得到食品中蛋白质含量。

一般是根据产品标准要求选测定方法的,食品中蛋白质测定的最常用方法当然是凯氮测定法:常量凯氏定氮法和微量凯氏定氮法。

简单的鉴别方法就是灼烧该物,如果有跟烧头发一样的味道就证明有蛋白质。或者往该物加双缩脲试剂,有蓝紫色物质生成就证明有蛋白质。

蛋白质的氮含量一般为15%~16%,按16%计算乘以25即为蛋白质,乳制品为38,面粉为7,肉及肉制品为25,大豆为71。

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